對于色譜分離模式的選擇應(yīng)采用多種分析柱對分離條件進(jìn)行測試，當(dāng)有多種模式可以選擇時，應(yīng)著重考慮下列因素，包括：

 

分辨率：即色譜填料對被測組分的選擇性

上樣量：即色譜填料對被測樣品的承載容量

分析速度：即對被測樣品的分離時間


制備柱分離性能測試步驟：

① 考慮到填料由分析級直接放大到制備級的因素，如果要純化大量的化合物，需要考慮分析柱的規(guī)格和可作為制備柱的填料粒徑（10µm或更大）；作為在下一步純化產(chǎn)品量更大的項目，必須考慮選擇更大的填料粒徑和更大內(nèi)徑的色譜柱，在與分析柱相同的填料下對產(chǎn)品進(jìn)行純化。

② 對分析柱（4.6mm內(nèi)徑或更?。┻x擇性的研究，應(yīng)在多種填料和多種色譜條件下進(jìn)行選擇，可以采用一些商品的液相色譜條件選擇軟件進(jìn)行多種色譜模式的比較選擇，這樣可以縮短分離條件選擇的時間。

③ 在得到*的分離條件后，需要對分析柱上樣品的承載量進(jìn)行測試，比較多種上樣量下產(chǎn)物的純度，選擇產(chǎn)物純度的zui大上樣量。

④ 選擇制備柱的規(guī)格，要依據(jù)在分析柱上得到的上樣量數(shù)據(jù)，進(jìn)行放大分離，通常選擇與分析柱相同粒徑的填料和色譜柱長度來達(dá)到推測制備分離的預(yù)測。放大制備柱的上樣量應(yīng)基于制備柱和分析柱的交叉截面面積的比值來進(jìn)行選擇。

⑤ 檢查制備色譜分離的結(jié)果和色譜餾出物的區(qū)域以及純度。